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細胞的體外培養(yǎng)檢測產品生物性能

發(fā)布日期: 2013-08-15
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1.實驗目的:

通過細胞的體外培養(yǎng)來檢測產品的生物性能是否達到要求。

2.實驗原理:

體外培養(yǎng)的細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或l:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng)。通過貼壁細胞的傳代培養(yǎng),觀察細胞的生長狀態(tài)可以反映出培養(yǎng)產品是否達到細胞培養(yǎng)的要求。

3.實驗材料:

3.1 抽檢樣品:

3.2 細胞株:VERO細胞系:*貼壁細胞,主要用于接種病毒的一種細胞。

3.3 實驗試劑:RPMI1640(8111031)、0.25%胰酶(876536)、小牛血清(8187648)、都購自廣州英韋創(chuàng)津生物試劑公司。

3.4 實驗耗材:3ml的巴斯德吸管、酒精燈、鑷子、酒精棉球。

3.5 實驗儀器:XDS-1倒置顯微鏡購自廣州粵顯光學儀器科技有限公司;

超凈工作臺購自蘇州凈化儀器設備公司;

4.實驗步驟:

4.1. 在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和密度,取生長良好的細胞若干瓶,棄掉舊培養(yǎng)液。

4.2. 加入胰酶消化細胞,消化適度后倒去胰酶。

4.3. 加入適量培養(yǎng)液反復吹打數(shù)次。

4.4. 細胞計數(shù)稀釋細胞密度為1×105/ml

4.5. 將細胞接種于抽檢樣品中:

5.實驗結果:

1、Vero細胞培養(yǎng)24小時后10×10倍下圖片

2、Vero細胞培養(yǎng)48小時后10×10倍下圖片

3、細胞計數(shù)

6.結果判定

這次抽檢樣品做細胞培養(yǎng)檢測,細胞生長狀態(tài)正常,貼壁生長良好,10%血清培養(yǎng)液培養(yǎng),細胞增長率符合企業(yè)標準。

 
 

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